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实验做不出来?先检查一下ELISA试剂盒买对了吗
发布时间:2019-08-19 阅读:118
    实验做不出来?先检查一下ELISA试剂盒买对了吗医学的发展离不开基础和应用研究,而科研用检测试剂则是zui为重要的科研工具之一。科研检测试剂主要包括蛋白、抗体和检测试剂盒,其中试剂盒的开发研制建立于蛋白及抗体之上。
    作为基础科研工具之一的科研试剂,其所处行业的混乱程度与科研实验的严谨要求并不匹配。“科研用检测试剂行业属于新兴行业,处于科学前沿,因此难以形成统一的行业标准,导致少数厂商浑水摸鱼。”
    分辨是否造假第一手段是看指标。国内某ELISA试剂盒生产企业创始人刘伟(化名)介绍,如果有公司成立时间不长,但可以做的指标特别大、又有比较偏门的指标,购买时需谨慎。
    造假的另一手段是用TGFβ来以假乱真。TGFβ是一类在大多数哺乳类动物中广泛表达的物质,其种属间抗原的氨基酸序列同源性达到100%,但在实验过程中会随其他因子影响而导致表达水平发生相应变化,“这些变化一般的客户很难察觉,有了这些万能指标,公司就能以假乱真。”
    试剂盒造假的主要有三种方法:第一种是前面所说的用一种指标去代替其他指标;第二种是用不同种属的试剂盒替代,由于同一种蛋白有一定同源性,实验结果的准确性可能会差一点。这两种造假方法都很常见,尤其是第一种。
    第三种方式是生产厂家生产出一个自认为合理的人造蛋白,人造蛋白经免疫后生产出抗体,这个抗体与人造蛋白结合是没问题的,但拿去与生物体的天然蛋白结合,就存在一定风险,甚至不一定能够检测。厂家并不会去验证通过这种方式生产的抗体是否对人造蛋白有效。
    如何鉴别ELISA试剂盒真假?
    科研实际造假会严重影响科研结果,正如上文中我们所看到,让科研工作者花费大量时间、金钱、精力做的研究没有成效的事并不鲜见。不少人疑惑:这种情况下我们如何鉴别真假试剂?网上给大家提供的点子如下:
    di1招,即:交叉实验法。
    交叉实验发辨别elisa试剂盒是指如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B,利用交叉实验即可辨别ELISA试剂盒是否造假。方法如下:
    (1)取出购买的试剂盒A的包被板两条。
    (2)一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。
    (3)另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。
    (4)后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。
    (5)实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B,即该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
    (6)如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。
    第2招:直接打电话给生产厂商,询问他们试剂盒抗原和抗体的来源,索要试剂盒说明书,然后利用网络确认这些信息,正规的ELISA生产商,这些信息都是非常齐全,如果信息不全,则该ELISA的制造水平和质量都会很差。
    第3招:将“厂家名”、“ELISA”和“假货”关键词在google上搜索,各类论坛的用户会将该ELISA试剂盒的质量和效果,是否伪劣一一有所讨论。
    第4招:比如用TGFβ这样的指标代替大多数试剂盒的其他指标作为检测抗体,同样可以获得良好的标准曲线。因为TGFβ在大多数哺乳类动物中(人、大鼠、小鼠、猪、牛……)都有广泛表达,种属间抗原的氨基酸序列同源性达100%,TGFβ随着其他因子的影响,其表达水平也会发生相应的变化,一般客户很难察觉,因此这样的恶性造假行为使得消费者被动造假,后果极其严重,因此善意提醒客户警惕此类作假试剂盒!
    在整个行业造假的情况下,这种鉴别方法管用吗?相信大家心中都不敢打保票。目前看来,需要提高的并不仅仅是消费者的鉴别能力,应着重整治的是行业监管,只有规范行业生产和运输过程,实现科研试剂制造全程可追溯,才是保证科研试剂有效的第一步。此外,生产企业的社会责任感和行业规范约束也不可少,每个人都有从众心理,因此对科研时机是否应进行注册审批也应提上日程。然而这个工作的难度可想而知,可没有规矩不成方圆,要促进科技的进步,这一环节应尽快完善起来









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