关于试剂盒的试验操作,每一个细节都直接影响着试验的成功与否。酶联免疫检测试剂盒的试验操作,这三点很重要!
一、洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
二、计算
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
三、酶联免疫检测试剂盒操作注意事项
1、如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数。
2、请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。
3、底物请避光保存。
4、酶联免疫检测试剂盒试验时,一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
5、在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
6、洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
|