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ELISA试剂盒的合理操作，这些细节需多加留意！

发布时间：2019-04-08 阅读：312次

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。实验操作中，每一个细节都直接影响着试验的成功与否ELISA试剂盒的合理使用，这些细节很重要：
1、封板膜只限一次性运用，以避免穿插污染。
2、ELISA试剂盒一切样品，洗刷液和各种废弃物都应按感染物处理。
3、如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔榜孔的OD值），请先将样本稀释必定倍数（n倍）后再测定，核算时请zui终乘以稀释倍数（×5×n）。
4、本试剂不一样批号组分不得混用。显色剂B请避光保留。
5、严厉依照说明书的操纵进行，ELISA试剂盒实验成果断定有必要以酶标仪读数为准。
6、各步加样均应运用加样器，并常常校正其正确性，以避免实验误差。一次加样时刻zui佳控制在5分钟内，如标本数目多，引荐运用排枪加样。
7、ELISA试剂盒从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装进密封袋中保留。
8、浓洗刷液可能会有结晶析出，ELISA试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响成果。

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