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酶联免疫检测试剂盒实验时的7个基本原则
发布时间:2018-05-08 阅读:432
上海继锦化学科技有限公司常年供应ELISA试剂盒,酶联免疫检测试剂盒,白介素ELISA试剂盒,细胞因子ELISA试剂盒。
酶联免疫检测试剂盒实验时的7个基本原则:
1、试剂准备:准备一次实验所需要的酶标条,其它的可从微孔板上拆下,密封,按照说明书要求保存,以备下次使用。
2、加样:实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。加样时注意不要有气泡,将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。加样或加试剂时,个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的「预温育」时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。因此,一次加样时间 (包括标准品及所有样品) 控制在 10 分钟内。推荐设置复孔进行实验。
3、温育:为防止样品蒸发,实验时请将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内,以避免液体蒸发,洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态,同时应严格遵守给定的温育时间和温度。
4、洗涤:充分的洗涤非常重要,在每次洗涤过程中,都要将洗涤液完全甩干。洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实 验过程中。
5、反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化 (比如,每隔 10 分钟观察一次),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
6、底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
7、如果实验室内湿度低于60%,推荐使用加湿器提高湿度水平。

 
 

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