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| 细胞因子ELISA试剂盒操作中的一些细节 |
| 发布时间：2019-02-19 阅读：395次 |
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ELISA试验操作中每个细节都直接关系着实验的成功与否，下面我们来看看细胞因子ELISA试剂盒操作中的一些细节：
1.保存：ELISA试剂盒中各试剂请按说明书提示合理存放。
在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染，否则可能会出现错误的结果。
2.酶标板：刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。暂时不用的板条应拆卸后放入备用铝箔袋，按推荐温度存放！
3.加样：加样或加试剂时，个孔与zui后一个孔的加样时间间隔如果太大，将会导致不同的“预温育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。每次的加样时间zui好控制在10分钟内。推荐设置复孔。
4.温育：为防止样品蒸发，实验时必须给酶标板覆膜；洗板后应尽快进行下步操作，避免酶标板处于干燥状态；严格遵守给定的温育时间和温度。
5.洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在吸水纸上拍干，勿将滤纸直接放入反孔中吸水。在读数前要注意清除底部残留的液体和手指印，以免影响酶标仪读数。
6.试剂配制：运输过程会使液体沾到管壁或瓶盖，因此使用前1000转/分离心1min，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。取用前，请用移液器小心吹打4-5次使溶液混匀。标准品、生物素化抗体工作液、酶结合物工作液请根据所需用量配制，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请配制标准品及工作液，尽量不要微量配制以避免由于不准确稀释而造成浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素化抗体工作液、酶结合物工作液。若需要分次使用标准品应按照每一次用量分装，将其放在-20～-80°C贮存。避免反复冻融。
7.显色时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如每隔5分钟），如梯度已很明显，请提前加入终止液终止反应，避免颜色过深影响酶标仪读数。
8.底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
9.混匀：充分轻微混匀对反应结果尤为重要，zui好使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器，可在反应前手工轻轻敲击酶标板框混匀。
10.安全：试验中请穿着实验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时，请按生物试验室安全防护条例执行。
11.不同批号的试剂盒组份不能混用（洗涤液和反应终止液除外）
12.试验中所用的EP管和吸头均为一次性使用，严禁混用，否则将影响试验结果！
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